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       @代测序技术是20世纪70年代中期由Fred Sanger及其同事@先发明。其基本原理是,聚丙烯酰胺凝胶电泳能够把长度只差@个核苷酸的单链DNA分子区分开来。@代测序实验的起始材料是均@的单链DNA分子。第@步是短寡聚核苷酸在每个分子的相同位置上退火,然后该寡聚核苷酸就充当引物来合成与模板互补的新的DNA链。用双脱氧核苷酸作为链终止试剂(双脱氧核苷酸在脱氧核糖上没有聚合酶延伸链所需要的3-OH基团,所以可被用作链终止试剂)通过聚合酶的引物延伸产生@系列大小不同的分子后再进行分离。测序引物与单链DNA模板分子结合后,DNA聚合酶用dNTP延伸引物。延伸反应分四组进行,每@组分别用四种ddNTP(双脱氧核苷酸)中的@种来进行终止,再用PAGE分析四组样品,从得到的PAGE胶上可以读出我们需要的序列。

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